リンパ球画分を抗 CD3 抗体、インターロイキン-２（ IL-2 ）などによる刺激を与えつつ培養して活性化させると同時に増殖させます。
CD3 分子は T 細胞表面で抗原を認識する T 細胞受容体の一部を構成する分子で、 T 細胞を抗 CD3 抗体で刺激すると T 細胞一般があたかも抗原刺激を受けたかのような影響を受けます。実際には抗 CD3 抗体を固着させた培養フラスコを用いて培養を行うと、 T 細胞にこのような刺激を与えることが出来ます。
IL-2 は T 細胞の増殖・活性化の因子で、遺伝子工学的に作られたものを使用します。 IL-2 を培養液に加えると T 細胞表面にある IL-2 受容体に結合してリンパ球の中でも T 細胞の増殖が起こります。
培養の前半で上記のような刺激をリンパ球に加え、培養液を段階的に増やしながら炭酸ガス培養器中で培養を続け、培養後半は比較的低濃度の IL-2 を含む培養液と炭酸ガス透過性のバッグを使用して、約２週間培養を続けます。血液約 23ml から得られたリンパ球を増殖させ、標準的には最終的に 2.4 リッターの培養とし、遠心分離によりリンパ球を回収し、洗浄します。培養の開始、中間および最終に無菌試験と発熱物質の混入についての試験を行い、陰性だった場合に患者さんに戻します。 このようなやり方で、２週間の培養で数十億個の活性化された T 細胞を得ることが出来ます。この方法により得られた細胞（ αβT細胞 と呼ばれる）は、がん細胞一般に対する強い細胞障害活性と、腫瘍壊死因子やインターフェロンガンマなどの有用なリンフォカインを生産する活性を持っています。しかしこの T 細胞は患者さん自身のがん細胞に対する特異性はありません。
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ガンマ・デルタT 細胞療法（γδT細胞療法）；血液のみで可能
血液中のＴ細胞はその受容体により、αβ T 細胞とγδ T 細胞に分けられます。ほとんどがαβ T 細胞でγδ T 細胞は数％程度の割合で存在しています。したがって、血液中の T 細胞全体を抗 CD3 抗体、インターロイキン-２（ IL-2 ）で増殖させた場合は、増殖する細胞のほとんどがαβ T 細胞となります（アルファ・ベータT細胞療法）。
瀬田クリニックグループでは、ビスフォスフォネートという薬品を応用することでこのγδ T 細胞を選択的に活性化・増殖させる独自の培養方法を用いて、 2007年10月よりガンマ・デルタT細胞療法を開始しました。リンパ球画分をビスフォスフォネートおよび IL-2 を加えた培養液中で約 2 週間培養します。ビスフォスフォネートとしては、がんの骨転移の治療に使用するゾレドロン酸（ゾメタ®）という医薬品を使用します。
ガンマ・デルタT 細胞療法は 2005年より日赤医療センター、東京大学附属病院との共同での臨床研究を進めてきました。γδ T 細胞は、その分泌する因子、がんを認識、攻撃方法などにおいて、αβ T 細胞とは異なった様々な機序を有しており、抗腫瘍効果を持つ新しい役割の細胞として、これまでの治療法に加えてさらなる選択肢を提供できるものと考えられます。また、骨へ集積しやすいゾメタ®を併用し、骨腫瘍、骨転移への応用が期待できます。また、γδ T 細胞は抗体医薬の作用機序の１つである抗体依存性細胞傷害作用に働く細胞であることから、抗体医薬と併用することでも相乗効果が期待されます。
※ゾメタ®はノバルティスファーマ社の商品名です。
